Lancet ：AAV、LNP递送单碱基图形化修复肝脏遗传病，且不产生脱靶效应

长久以来，帕金森氏症哮喘一直是头疼生物的困境，无论是生活习惯中都尤为常见的红绿色盲，还是头疼拉丁美洲皇室数个世纪的糖粪病，这些因遗传缺陷而造成了的哮喘不仅对患者的生活习惯所致阻碍，还构成威胁着患者的生命安正因如此，愈来愈最主要的是，生物已发掘出数千种帕金森氏症哮喘，但对其中都的绝大多数仍束手无策。

世人庆幸的是，DNA学的兴起使得生物力图认知突变突变突变的本质——叫做突变本身的突变突变。基于此，如果我们只能对这些突变突变的突变核糖体同步进行精确的总编辑，使其改成正确的胺基酸对，那就可以从根本上彻底治愈这些生物突变突变突变。

基于CRISPR系统设计的胺基酸图形化就是一项极其有希望的、可用于突变突变突变治疗的关键技术。但遗憾的是，一些深入研究断定，胺基酸图形化具有脱靶现象，可能会对正常突变核糖体同步进行非抑制剂的总编辑。如果不能解决这一问题，胺基酸图形化在生物突变突变突变治疗中都的应用将遥遥无期。

2021年1年底25日，日内瓦卢塞恩联邦理工学院、卢塞恩大学以及维也纳大学等均是由的联合制作团队在 Nature Biomedical Engineering 杂志上出版了题为：In vivo cytidine base editing of hepatocytes without detectable off-target mutations in RNA and DNA 的深入研究期刊。

这项深入研究通过疣就其病毒（AAV）和钙基体微粒（LNP）两种送出表现形式，分别向大鼠甲状疣送出核苷酸胺基酸图形化（CBE），并对其同步进行正因如此mRNA组和正因如此DNA脱靶修饰的无偏倚统计分析。

深入研究职员发掘出，通过这两种表现形式送出的核苷酸胺基酸图形化可以修复致病突变突变，而不会在上皮细胞内的RNA和DNA中都产生脱靶突变突变。这一结果支持了核苷酸胺基酸总编辑治疗帕金森氏症甲状疣哮喘的有效性。

据统计，单胺基酸突变突变占正因如此部已发掘出的生物遗传哮喘的大平均2/3，同时也是许多动植物最主要变异变异的遗传基础。因此，联合开发一种精确且只能颇高效借助于单胺基酸替换的技术就显得尤为最主要，华人生物学家刘如谦（Did Liu）领导的深入研究制作团队联合开发的胺基酸图形化就是为此而生。

核苷酸胺基酸图形化（CBE）正是刘如谦研究室联合开发的一种胺基酸图形化，它可以借助于C？G胺基酸对至T？A胺基酸对的直接替换。

然而，最近的一些深入研究却断定核苷酸胺基酸图形化（CBE）可以在细胞内系中都造成了非抑制剂的正因如此mRNA组脱靶突变突变，并在诱导的多能干细胞内和两细胞内期胚胎中都造成了数百个正因如此DNA脱靶突变突变。此外，核苷酸胺基酸图形化（CBE）中都所常用的脱氨酶——rAPOBEC1，其在体外的过传达将可能造成了大鼠甲状疣肥大和上皮细胞内乳癌。

由此看来，审核核苷酸胺基酸图形化（CBE）等胺基酸图形化的脱靶现象以及其他妨碍现象是极其必要的。

在这项深入研究中都，为了审核核苷酸胺基酸图形化（CBE）在体外确实实际上脱靶现象，深入研究制作团队重点深入研究了Pahenu2粪大鼠模型，并将SaKKH-CBE3胺基酸总编辑系统设计通过AVV介导送出到大鼠甲状疣中都。紧接着，深入研究制作团队常用RNA测序（RNA-Seq）对从大鼠甲状疣中都提取的RNA同步进行统计分析。

AVV介导的SaKKH-CBE3系统设计的Pahenu2大鼠甲状疣送出和脱靶现象审核统计分析

深入研究职员推论到23%的化学合成总编辑，但与未处理的对照组远比，mRNA组范围内的C→U的转变并很难减小。愈来愈有趣的是，当转染对乙酰氨基酚的SaKKH-CBE3 mRNA时，虽然与真核生物转染远比，核苷酸胺基酸图形化（CBE）传达减低了18倍，但在保留63%的前提总编辑的同时，还大大减低了非化学合成突变突变。

这一结果断定核苷酸胺基酸图形化（CBE）的过传达可能与颇高的非化学合成总编辑领军都与。

CBE的过传达可能与颇高的非化学合成总编辑领军都与

与此同时，深入研究制作团队还审核了AAV介导的SaKKH-CBE3系统设计在转入Pahenu2大鼠便确实会造成了DNADNA的非化学合成总编辑。正因如此DNA测序（S）统计分析断定，SaKKH-CBE3系统设计并未在大鼠甲状疣中都改成显著的DNA脱靶突变突变。

SaKKH-CBE3系统设计可以借助于化学合成总编辑总编辑，且未所致显著的RNA和DNA非化学合成突变突变

除此之外，深入研究制作团队还通过钙基体微粒（LNP）送出SaKKH-CBE3 mRNA和就其的sgRNA。他们的深入研究结果断定，在钙基体微粒（LNP）送出的规律性传达SaKKH-CBE3系统设计便，可造成了平均21%的抑制剂总编辑并大逆转了Pahenu2大鼠的哮喘特异性，同时也很难检测到正因如此mRNA组和正因如此DNA的脱靶总编辑。

钙基体微粒（LNP）送出的总编辑效领军和安正因如此性结果，不输于疣就其病毒（AAV）表现形式。

通过钙基体微粒(LNP)向大鼠甲状疣中都送出SaKKH-CBE3系统设计

综上所述，SaKKH-CBE3系统设计在AAV或LNP介导的甲状疣送出后的传达不仅能有效替换化学合成突变突变、大逆转Pahenu2大鼠的哮喘特异性，还不会对甲状疣细胞内中都的RNA和DNA所致实质性的非抑制剂总编辑。这一发掘出支持了核苷酸胺基酸图形化（CBE）在治疗帕金森氏症甲状疣哮喘的有效性！

原始出处：

Chaolin Huang 1, Lixue Huang 2, Yeming Wang 3,et al.6-month consequences of COVID-19 in patients discharged from hospital: a cohort study.Lancet. 2021 Jan 16;397(10270):220-232. doi: 10.1016/S0140-6736(20)32656-8. Epub 2021 Jan 8.